转染行径怎么选
你确凿了解电转吗?
LONZA
▲转染是将外源性基因导入细胞内的一种有益技能。《分子克隆实验指南》将转染(Transfection)界说为:“将外源基因导入哺乳动物细胞的一系列技能的统称”,实践中细胞转染是指将外源分子如DNA、RNA、卵白等生物活性分子导入真核细胞的技能。
▲按照旨趣来分类
细胞转染的神情不错分为3类:化学法、物理法和生物介导行径。电转染手脚具有代表性的物理行径转染,出现于1982年,手脚通用、易用的细胞转染行径,具有其他行径无法比较的上风,如重叠性好、适用鸿沟广等特色,在一定条目下兼得电转效果和细胞活率,尤其对当今对原代细胞和一般以为难转染的细胞有较好的转染效果。
▲各转染行径优症结整理
01
Nucleofector™技能
▲Nucleofector™技能
跟着系统生物学与交义学科行径的应用,要求细胞和系统模子越来越接近体内细胞的功能。这就意味着未来的细胞转染多量会是原代细胞的转染。而传统的行径很难奏效转染原代细胞。另外即使使用细胞系作念为系统模子,传统的行径也难重叠出好的细胞转染效果与成活率。Nucleofector技能就从根柢上责罚这个问题,岂论是原代细胞、干细胞、也曾细胞系,它每次齐可重叠出很高的转染效果。
▲旨趣
Nucleofection”技能是应用电击在细胞膜上开个小孔,概述各式特定细胞转染症结与转染液的作用,核酸底物不仅不错干预细胞质,还可成功通过核膜干预细胞核。这使得细胞最高转染可达99%,而况结束转染不依赖于细胞的阔别。
▲上风
与其他电转行径相比,4D-Nucleofector™核转系统,除了Lonza所研发的适用于不同实验指标的电转仪设立以外,还配套不同细胞专属的电转试剂。该系统改良了传统金属电极材质的电极杯,通过高分子导电团聚物踏实电脉冲发生的流程,幸免金属离子开释对细胞带来的毒性。操作浅薄生动、通量多元化、还有保护细胞功能贴壁转染模块(Y模块)无需消化就可转染,更好的保护细胞功能,非常适用于发育到后期的神经元转染。
02
4D-Nucleofector核转染系统
▲Lonza 4D Nucleofector™平台从内容需求启程,拓荒了从低通量到高通量,小体积到大体积的电转染,研发到坐蓐鸿沟的设立型号,保证从小体系筛选到大鸿沟电转的可行性和放大工艺可更正。包括如下功能模块并匹配对应应用主张:
▲只需5步浅薄的操作有联想,结束纵情电转!!!
▲4D-Nucleofector™ 核转系统,除了电转仪设立自己以外,还有不同细胞专属的电转试剂,不错复古在不同类型的细胞中齐不错结束高效的,同期保管细胞功能的转染放置。该系统改良了传统金属电极材质的电极杯,通过一种专利技能应用高分子导电团聚物踏实电脉冲发生的流程,幸免金属离子开释对细胞自己带来的金属离子毒性影响。在Lonza Bioscience官网Knowledge Center内部呈现了逾越700种即用型protocol(包括细胞培养,传代、电转准备、电转有联想、孵育行径以及优化有联想)及海量的府上和应用FAQ(且一直在内容各地技能团队的相助下不休更新)。
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